Anatomopathologie

Qu'est-ce que c'est?

La discipline « anatomie et cytologie pathologiques » est l'étude des altérations organiques des tissus et des cellules provoquées par la maladie.
Ces altérations peuvent être observées à l'œil nu (lésions macroscopiques), au microscope optique (histopathologie et cytopathologie) ou au microscope électronique (lésions ultrastructurales). Elles sont reconnues par comparaison avec les structures normales. L'étude microscopique permet également la mise en évidence dans les cellules ou les tissus de certains composés chimiques (histochimie), d'enzymes (histo-enzymologie) et de constituants antigéniques précis (immunohistochimie).
L'anatomopathologie présente un intérêt majeur pour l'identification des maladies. De nombreuses affections (cancers par exemple) ne peuvent être reconnues avec précision que par l'examen au microscope d'un fragment de la lésion (histopathologie) ou d'un étalement de cellules isolées (cytopathologie). Cette étude apporte également des informations précieuses sur l'extension des lésions par l'examen des pièces opératoires (organes ou tissus prélevés lors d'une intervention), permettant ainsi de choisir le traitement le plus approprié.
Enfin, l'anatomopathologie, par la pratique de l'autopsie, aide à comprendre l'enchaînement des symptômes et la cause de la mort.

L'équipe

• Chef de Service : Dr Lorette JITARU
• Cadre de Santé : Nadia LE ROSSIGNOL
• Pathologistes : Dr Jean-Jacques MICHELS, Dr Hubert ELIE, Dr Christina DIKOGLOU, Dr Marie ROSSATO
• Technicien(ne)s de laboratoire, secrétaires et agents de service.

Renseignements pratiques

Secrétariat ouvert du lundi au vendredi de 9h00 à 17h00, fermé les week-ends et jours fériés.
02.33.20.76.31
02.33.20.76.49
secretariat.anapath@ch-cotentin.fr
Accès :
Le service d'anatomie et de cytologie pathologiques se trouve au deuxième étage, côté Est de l’ancien hôpital.

Les Activités

En pratique l’anatomie pathologique concerne les prélèvements cytologiques, les prélèvements biopsiques, les pièces opératoires et les autopsies. Elle comprend différentes techniques :

• La macroscopie
• L'histologie
• Les examens extemporanés
• La cytologie
• L'immuno-histochimie

L'anatomie pathologique macroscopique (ou macroscopie), effectuée à l'œil nu :

Le prélèvement est décrit et mesuré et, éventuellement, schématisé ou photographié (selon des protocoles pré-établis pour chaque organe). Ensuite, les fragments de petite taille (biopsie etc...) sont mis en totalité dans une cassette plastique. Pour les grosses pièces, on sélectionne des tranches d’intérêt suivant le protocole adapté à la pathologie.

L'histologie pathologique effectuée au microscope :

Les étapes suivantes sont effectuées dans le but d'obtenir des coupes de tissus colorées à partir des fragments précédemment mis en cassette, afin de les observer au microscope.

• L'imprégnation en paraffine:
  Les prélèvements (contenus dans les cassettes) ont préalablement été fixés en formaldéhyde ou en AFA (Alcool/Formol/Acide acétique) ce qui permet la conservation morphologique des structures tissulaires et cellulaires. Ensuite on remplace l’eau des prélèvements par de l'alcool (déshydratation), puis par du xylène et enfin par de la paraffine fondue. Cette imprégnation est effectuée dans un automate. Le cycle dure environ quatorze heures, ce qui explique que les résultats ne peuvent être adressés au plus tôt que le lendemain.
  
• L'enrobage:
  On effectue le moulage du prélèvement dans un bloc de paraffine.
  
• La microtomie:
  Après refroidissement et démoulage des blocs de paraffine, on y fait des coupes de 4 à 5 μm d'épaisseur (grâce à un microtome) pour obtenir une seule couche de cellules. Ces coupes s'attachent les unes aux autres pour former un ruban.
  
• L'étalement:
  Quelques coupes du ruban sont étalées sur des lames à l'aide d'eau albuminée, sur une platine chauffante.
  
• Séchage des lames à l'air chaud.
  On place les lames dans un sèche-lames quelques minutes pour augmenter l’adhérence des coupes sur les lames.
  
  
• La coloration:
  La coloration de routine (HES) est effectuée dans un automate. Après déparaffinage puis réhydratation, les coupes sont colorées par des passages dans des produits chimiques afin de différencier par des couleurs les composants du prélèvement (noyaux, cytoplasmes etc.).
  
• Le montage:
  Après déshydratation, un automate colle une lamelle très fine sur la lame avec une goutte de baume.
  
  
• Lecture et interprétation:
  Les lames sont ensuite examinées au microscope et interprétées.
  
• Archivage:
  Les lames et les blocs sont conservés indéfiniment.
  
  
• Compte-rendu:
  Un compte-rendu dactylographié est adressé dans le service. Il est archivé sur ordinateur avec les renseignements cliniques et les conclusions codées.

Les examens extemporanés

Dans certaines situations, le chirurgien a besoin d’un premier diagnostic pendant l’opération. Dans ce cas nous avons recours à une technique rapide (moins de 20 minutes).
Le prélèvement frais est posé dans un milieu d'enrobage spécial sur un portoir en métal. Le tout est congelé dans de l'azote liquide.
La coupe est effectuée dans un cryostat (enceinte réfrigérée à -25°C ou -30°C contenant un microtome).
Les coupes congelées obtenues sont recueillies sur une lame et colorées en technique rapide.
Le reste du prélèvement sera traité le lendemain (après fixation au formol) selon la procédure habituelle pour confirmer le résultat (car la méthode extemporanée ne porte que sur une partie de la pièce).

La cytologie

Consiste en l'étude de cellules colorées (sur lames) à partir de divers prélèvements biologiques (bronchiques, gynécologiques, liquides d'épanchement, ponctions...)
Les prélèvements peuvent être :

• Soit centrifugés avec ensuite étalement du culot sur lame et coloration (technique de Papanicolaou). Le reste du culot étant fixé en AFA et traité comme un prélèvement histologique.
  
• Soit cyto-centrifugés: lorsque le liquide est peu cellulaire, la cyto-centrifugeuse permet de concentrer les cellules directement sur une petite portion de lame («spot» cellulaire).
  
  
• Soit filtré (urines). Les filtres sont ensuite apposés sur une lame.
  Après fixation dans des pots l'alcool à 95%, les lames sont colorées par la coloration de Papanicolaou qui est faite dans le même automate que pour l'histologie.
• Les étalements fixés au spray (frottis cervico-vaginaux) sont directement colorés par la coloration de Papanicolaou effectuée dans un automate.
• Les frottis cervico-vaginaux en phase liquide sont traités par l'automate Novacyt puis colorés par la coloration de Papanicolaou.

L’immuno-histochimie

C'est une méthode de localisation de protéines dans les cellules d'une coupe de tissus par détection d'antigène grâce à un anticorps spécifique couplé à une enzyme. Le couple anticorps/enzyme réagit avec un substrat pour donner une réaction colorée facile à visualiser au microscope.

Elle est utilisée dans quatre indications essentielles en cancérologie :

• La recherche du type histologique,
• La recherche de la nature (primitive ou secondaire) et de l'origine d'une métastase,
• La recherche de facteurs pronostiques (facteurs de prolifération),
• La recherche de facteurs prédictifs de la réponse aux traitements.

Cette technique est effectuée dans un automate.

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